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資源與能源問題是目前面臨的普遍問題。木質(zhì)纖維原料因其可再生性和綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)越來越引起人們的重視，并由此從石油精煉(Refinery)引出了生物質(zhì)精煉(Biorefinery)的概念。利用自然界豐富廉價(jià)的木質(zhì)纖維素資源獲取生物燃料和化學(xué)品已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。糖類物質(zhì)是木質(zhì)纖維素中碳水化合物的主要組成部分，是植物光合作用中碳同化作用的主要形式，占植物干重的85％～90％[1]，是地球上為豐富、復(fù)雜的有機(jī)大分子。生物質(zhì)精煉充分開發(fā)糖平臺(tái)化合物是可再生資源開發(fā)的大方向。然而要開展這些重大科研項(xiàng)目并加深理論機(jī)理研究，都要以糖類物質(zhì)的基礎(chǔ)分析作為切入點(diǎn)。在木質(zhì)纖維生物質(zhì)精煉利用的過程中，由于傳統(tǒng)木質(zhì)纖維利用的造紙工業(yè)存在將半纖維素等以黑液的形式燃燒獲取熱能的不合理利用方式[2]，造紙產(chǎn)業(yè)升級(jí)為綜合林基生物質(zhì)精煉工廠過程中，糖類物質(zhì)的新利用方向?yàn)榘肜w維素的有效利用。在木質(zhì)生物質(zhì)中半纖維素是僅次于纖維素的主要糖類成分，它是由幾種不同類型的單糖構(gòu)成的異質(zhì)多聚體，包括木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖等。因而半纖維素的有效利用要求進(jìn)一步確定不同工藝下半纖維素水解糖液中各種糖和糖醛酸，從而在理論上指導(dǎo)科研與產(chǎn)品生產(chǎn)。在生物質(zhì)精煉過程中篩選并構(gòu)建一套規(guī)范且有效的復(fù)雜糖類體系分析方法是該領(lǐng)域科研工作者共同面臨的課題，本文通過借鑒相關(guān)領(lǐng)域的新現(xiàn)代儀器分析方法，對(duì)這一課題進(jìn)行了淺析，以期能為讀者提供綜合參考。

1木質(zhì)生物質(zhì)及水解液糖類組分

按照聚合度來分，糖類物質(zhì)可分為：?jiǎn)翁?、寡聚糖和多聚糖。按照糖所含的功能基團(tuán)來分，可分為醛、酮、醇和它們的氧化還原衍生物，以及由糖苷鍵連接此類化合物的聚體。在植物中糖類物質(zhì)主要是纖維素和半纖維素。纖維素糖類組分較為單一，本論文要點(diǎn)主要針對(duì)生物質(zhì)精煉過程中的組分更為復(fù)雜的半纖維素。研究表明，半纖維素是由多種糖單元組成的，常見的有木糖基、葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基等；并且半纖維素分子中還含有糖醛酸基（如半乳糖醛酸基、葡萄糖醛酸基等）和乙?；?；分子中還常有數(shù)量不等的支鏈。由此可見，半纖維素是由多種糖基、糖醛酸基所組成的，并且分子中往往帶有支鏈的復(fù)合聚糖的總稱[3]。一般針葉木中半纖維素含量為15％～20％，以聚葡萄糖甘露糖為主，同時(shí)還有少量聚木糖；而闊葉木中的半纖維素一般占木材的20％～25％，也有的高達(dá)35％，主要是聚木糖類，同時(shí)還伴隨有少量的聚葡萄糖甘露糖和聚鼠李糖半乳糖醛酸木糖，其中聚木糖類主要是聚O-乙酰基-(4-O-甲基葡萄糖醛酸)木糖。不同原料的半纖維素含量及組成不同。同時(shí)不同的生物質(zhì)精煉過程中分離半纖維素的水解液組分也有很大差異，并且由于水解程度的不同而形成了復(fù)雜體系。但就單糖分析而言主要針對(duì)葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖的定量檢測(cè)。

2生物質(zhì)精煉過程糖類傳統(tǒng)分析方法

復(fù)雜體系糖類分析在生物質(zhì)精煉過程中具有重要意義。在生物質(zhì)精煉的半纖維素利用過程中，由于半纖維素本身糖基和糖醛酸基種類的多樣化，使得對(duì)于半纖維素利用技術(shù)的機(jī)理研究在很大程度上依賴于多種低聚糖、寡糖及單糖的定性和定量分析。傳統(tǒng)方法由于不能對(duì)復(fù)雜體系的糖類物質(zhì)進(jìn)行分離而難以準(zhǔn)確分析。傳統(tǒng)的菲林法、DNS等化學(xué)分析方法只是對(duì)還原糖等給出定量分析。在制漿造紙檢測(cè)分析中，傳統(tǒng)化學(xué)分析的聚戊糖含量也是通過鹽酸水解成戊糖并進(jìn)一步脫水形成糠醛，通過糠醛含量的測(cè)定來間接表達(dá)半纖維素中的五碳糖高聚物[4]。但這些方法對(duì)于生物質(zhì)精煉半纖維素水解的機(jī)理研究和產(chǎn)品開發(fā)不能提供更實(shí)質(zhì)性的幫助。早期采用的酶分析法、紙色譜法、薄層色譜法及柱層析法等經(jīng)典方法可以進(jìn)行混合糖的分析，但分辨率低、時(shí)間長(zhǎng)、定量測(cè)定困難，使得這些具有初步分離效果的傳統(tǒng)方法也受到了限制。隨著現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的發(fā)展，混合體系的糖類分析也隨之產(chǎn)生了新的分析方法。

3混合糖類組成分析方法

3.1離子色譜法(IC)應(yīng)用離子色譜法是將改進(jìn)后的電導(dǎo)檢測(cè)器安裝在離子交換樹脂柱后，以連續(xù)檢測(cè)色譜分離的離子的方法。1975年H．斯莫爾等人將經(jīng)典的離子交換色譜與高效液相色譜技術(shù)相結(jié)合，創(chuàng)造了使用連續(xù)電導(dǎo)檢測(cè)器的現(xiàn)代離子色譜法，現(xiàn)代離子色譜使用小粒度和低交換容量的樹脂及小柱徑的分離柱以及進(jìn)樣閥進(jìn)樣，泵輸送洗脫液，具有迅速、連續(xù)、高效、靈敏、可同時(shí)測(cè)定多組分、不需要預(yù)先衍生化等優(yōu)點(diǎn)，可用于分析幾乎所有的單糖、大部分的寡糖及低聚糖。彭云云等[5]采用離子色譜法分析甘蔗渣半纖維素中各種糖基及糖醛酸，水解液經(jīng)中和、過濾、稀釋即可測(cè)定，采用色譜條件：色譜柱：淋洗液：0.001molNaOH-0.05molNaAC；CarboPaePAl(2×250mm)，保護(hù)柱：CarboPacPAl(2×50mm)；柱溫：30℃；體積流量：0.650ml/min；進(jìn)樣體積：10μL；檢測(cè)器：脈沖安培檢測(cè)器，金電極。結(jié)果表明氫氧化鈉和醋酸鈉淋洗液梯度洗脫可以分析糖醛酸及單糖組成，靈敏度高、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確。

3.2高效液相色譜法(HPLC)應(yīng)用高效液相色譜(HPLC)采用高壓液相泵、高效固定相和高靈敏度檢測(cè)器，具有分辨率高、分離速度快、分離效果好、不破壞樣品、重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)。單糖檢測(cè)器有紅外檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、光散射檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器和紫外檢測(cè)器。由于糖類本身沒有紫外吸收，若不進(jìn)行衍生化只能采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)或示差折光檢測(cè)器(RI)。將糖類物通過衍生化轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂凶贤馕栈蚩僧a(chǎn)生熒光的物質(zhì)可實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測(cè)和痕量分析，但操作復(fù)雜。方宏等[6]用高效液相色譜法測(cè)定甘蔗渣半纖維素水解物中的單糖含量。以HypersilNH2柱為色譜分析柱，用示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，流動(dòng)相是乙腈∶水(8∶20)。在此色譜條件下，甘蔗渣半纖維素水解物分離成：木糖、阿拉伯糖、果糖和葡萄糖。各單糖呈良好的線性關(guān)系。加樣回收率的平均值為97.3%～98.7%，此方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，適合檢測(cè)下限要求不高的生物質(zhì)半纖維素水解糖液。AloiaRomaní等[7]對(duì)桉木生物質(zhì)精煉過程中自催化半纖維素糖液中葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、糠醛、羧甲基糠醛等進(jìn)行了高效液相色譜一次性分析，而低聚糖則采用4%硫酸水解后二次測(cè)定單糖增加量的方法，作為實(shí)驗(yàn)過程中的常規(guī)檢測(cè)操作快捷、重現(xiàn)性好。利用HPLC測(cè)糖，要根據(jù)樣品中的糖的種類、含量和純度來選擇合適的檢測(cè)器，同時(shí)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需要決定是否需要較為復(fù)雜的衍生化過程及昂貴的糖柱。

3.3高效陰離子交換-脈沖安培檢測(cè)法（HPAE-PAD）應(yīng)用高效陰離子交換-脈沖安培檢測(cè)法（HPAE-PAD）是一種陰離子交換色譜與脈沖安培檢測(cè)器結(jié)合的新的液相色譜法，檢測(cè)*可達(dá)到幾十個(gè)ug/L水平。糖類化合物是一種多羥基醛或酮，可分為單糖、低聚糖和多糖，低聚糖由2～10個(gè)單糖分子失水而成，多糖是由10個(gè)以上單糖分子失水而得，低聚糖和多糖水解后即得單糖。中性糖類為Pka在12～14之間的弱酸。在高pH值的淋洗液中，例如10～20mmol/LNaOH中，它們會(huì)部分或全部以陰離子形式存在，能在陰離子交換柱上保留并得到分離。梁立娜等[8]利用高效陰離子交換-脈沖安培檢測(cè)（HPAE-PAD）同時(shí)分離測(cè)定8種單糖和2種糖醛酸。以CarboPacPA20陰離子交換柱為分離柱，以2mmol/LNaOH溶液將8種單糖從分離柱上洗脫，而后用NaAc（50～200mmol/L）梯度淋洗2種糖醛酸，淋洗液流速0.5ml/min，分析時(shí)間30min。8種單糖和2種糖醛酸的檢出限為2.5～14.4μg/L。5mg/L的10種化合物的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)7次進(jìn)樣，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3%～1.5%。用所建立的方法測(cè)定了多糖水解液和木材半纖維素水解液中的單糖和糖醛酸含量。劉婷[9]利用高效陰離子交換分離-脈沖安培檢測(cè)分析不同茶葉多糖中的葡萄糖、半乳糖、甘露糖和果糖。陰離子交換柱：METROSEPCARB(150×4.0mm)；淋洗液：6.0mmol/LNaOH溶液；柱溫：32℃；淋洗液流速：1.0ml/min；分析時(shí)間：45min；進(jìn)樣體積：20μl。優(yōu)化條件下4種單糖的檢出限為0.125～2.0mg/L。樣品測(cè)定的回收率為91.8％～99.3％。所建立的方法分析4種常見茶葉多糖快速、有效。高效陰離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)(HPAEC-PAD)的一大優(yōu)點(diǎn)是不需要衍生化就能分析單糖、大部分的寡糖及低聚糖，節(jié)約時(shí)間和資金，避免了有毒衍生試劑的使用，對(duì)于組成結(jié)構(gòu)大小上非常相近的單糖也有很好的分離效果。

3.4氣相色譜法(GC)應(yīng)用氣相色譜是多糖結(jié)構(gòu)分析中重要的手段之一，它與質(zhì)譜聯(lián)用可以得出有關(guān)單糖殘基類型、鍵的連接方式、糖的序列和糖環(huán)形式、聚合度等多種結(jié)構(gòu)信息。此外，由于大量的固定液和不同的檢測(cè)器適用于糖的氣相色譜分析，因而用氣相色譜法測(cè)定糖類具有樣品用量少、選擇性好、分辨率強(qiáng)、靈敏度高以及可用于定性及定量分析等優(yōu)點(diǎn)。康學(xué)軍等[10]以三水解白芷多糖，水解產(chǎn)物中加入鹽酸羥胺、吡啶和醋酸酐，衍生化反應(yīng)生成糖腈乙酸酯衍生物，采用氣相色譜法測(cè)定白芷多糖的單糖組成。用OV-101毛細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣溫度為210℃；檢測(cè)器溫度為240℃；柱溫為程序升溫：初始柱溫110℃，維持5min，以5℃/min的升溫速率升高到190℃，維持4min，以3℃/min的升溫速率升高到210℃，維持20min。白芷多糖中含有木糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖等7種單糖成分，并測(cè)定計(jì)算出已知6種單糖：鼠李糖-阿拉伯糖-木糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖的摩爾構(gòu)成比1.19∶1.19∶0.765∶1∶8.08∶3.34。氣相色譜法（GC）分析糖類，主要困難在于糖類沒有足夠的揮發(fā)性，須在色譜分析之前預(yù)先轉(zhuǎn)化成對(duì)熱較穩(wěn)定的、易揮發(fā)的衍生物。但在衍生物的制備過程中，由于糖的異構(gòu)化會(huì)產(chǎn)生衍生物的異構(gòu)體，使色譜分析時(shí)每種糖產(chǎn)生幾個(gè)峰，從而影響了組分的分離和定量。

3.5薄層色譜法(TLC)應(yīng)用薄層色譜法(TLC)是一種微量、快速、簡(jiǎn)便、有效的定性的半定量和定量分析方法。薄層色譜的特點(diǎn)是可以同時(shí)分離多個(gè)樣品，分析成本低，對(duì)樣品預(yù)處理要求低，對(duì)固定相、展開劑的選擇自由度大，適用于含有不易從分離介質(zhì)脫附或含有懸浮微?；蛐枰V后衍生化處理的樣品分析。而新的高效薄層色譜(HPTLC)采用更細(xì)、更均勻的改性硅膠和纖維素為固定相，對(duì)吸附劑進(jìn)行疏水和親水改性,可以實(shí)現(xiàn)正相和反相薄層色譜分離，提高了色譜的選擇性。焦廣玲等[11]建立了不同展開體系中薄層色譜分析單糖或寡糖的有效方法。以淀粉寡糖、右旋糖酐寡糖以及古羅糖醛酸寡糖3個(gè)系列寡糖和半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、巖藻糖、木糖和鼠李糖9種單糖為研究對(duì)象，探討其在不同展開體系下的薄層色譜行為。在各種糖TLC分析中，若供試品中主要含有酸性寡糖，則選擇甲酸展開體系；若供試品含有不同連接方式的中性寡糖，則選擇氨水展開體系進(jìn)行二次展開；若只對(duì)單糖進(jìn)行分離鑒別，應(yīng)采用三乙胺展開體系，并采用苯胺一二苯胺顯色劑，根據(jù)Rf值和顯色的不同，區(qū)別單糖的類型。于立芹[12]等測(cè)定紅薯葉中多糖，經(jīng)Sephadex-G100凝膠層析法純化后，利用薄層色譜法結(jié)合酸水解，糖腈乙酰化氣相色譜分析法測(cè)定紅薯葉多糖的單糖組成和各組成的物質(zhì)的量比。紅薯葉多糖的單糖組分有木糖、甘露糖、葡萄糖，其量的比為0.47∶0.35∶0.18。糖腈乙酸酯衍生化方法能較好地實(shí)施紅薯葉多糖水解產(chǎn)物的衍生化。衍生產(chǎn)物經(jīng)干燥沒有發(fā)現(xiàn)色譜峰明顯拖尾現(xiàn)象，適于單糖衍生化產(chǎn)物GC分析前的處理。

3.6高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)是近年來發(fā)展快的分析方法之一。是以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異實(shí)現(xiàn)分離測(cè)定的液相分離方法[13]。毛細(xì)管電泳技術(shù)分離糖必須解決電荷問題，除氨基糖、糖醛酸及一些硫酸化糖外，天然糖分子都呈電中性，不能在電場(chǎng)中遷移。因此糖的毛細(xì)管分離分析中要采用解離、絡(luò)合、衍生技術(shù)使糖帶電。汲晨鋒等[14]采用水提醇沉法從新鮮蘆筍中提取粗多糖，采用高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定單糖組成，可以實(shí)現(xiàn)蘆筍粗多糖中的木糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖的分離測(cè)定，得到其百分比分別為3.44％、7.92％、10.52％、17.15％、41.85％。研究發(fā)現(xiàn)其緩沖鹽濃度和pH值對(duì)單糖組分的分離度影響較大，文章通過比較發(fā)現(xiàn)緩沖鹽濃度為75mmol/L、pH10.5時(shí)，分離度好。通過蘆筍多糖和混合單糖的的毛細(xì)管電泳圖譜比較，可鑒別出大部分單糖。該技術(shù)分離效果清晰、定量準(zhǔn)確、時(shí)間短、進(jìn)樣量少，獲得了較好的結(jié)果。汪紅等[15]采用苯酚-硫酸比色法測(cè)定了丹參藥材中總多糖的含量，檢測(cè)波長(zhǎng)為490nm，丹參總多糖在0.1122～0.561mg范圍內(nèi)其濃度與吸光度線性關(guān)系良好(r=0.9998)；以毛細(xì)管電泳法測(cè)定丹參粗多糖組成，檢測(cè)波長(zhǎng)206nm，結(jié)果顯示，丹參粗多糖由鼠李糖∶木糖∶核糖∶葡萄糖∶甘露糖∶阿拉伯糖∶半乳糖以2.8∶1.0∶8.5∶12.7∶4.2∶15.3∶58.8的摩爾比組成。

3.7質(zhì)譜及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)由于組成單糖種類與數(shù)目等的不同，糖的結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，要*闡明一個(gè)糖的結(jié)構(gòu)，需要提供以下幾方面的信息：（1）分子量及組成單糖的種類與摩爾比；（2）各糖環(huán)的構(gòu)象（呋喃型或吡喃型）與異頭碳的構(gòu)型；（3）各糖殘基間的連接方式；（4）糖殘基的連接順序；（5）二級(jí)結(jié)構(gòu)及空間構(gòu)象等。質(zhì)譜，尤其是GC-MS（EI或CI方式）用于單糖分析已有幾十年的歷史，現(xiàn)已廣泛用于糖組成分析及甲基化分析以確定糖殘基的連接方式。徐正華等[16]建立了氣相色譜-質(zhì)譜(GDMS)法同時(shí)測(cè)定乳酸和葡萄糖、葡萄糖-6-磷酸、果糖、半乳糖、乳糖、1,5-脫水山梨醇、山梨醇7種糖的方法。選擇核糖醇為內(nèi)標(biāo)，進(jìn)樣前行肟化反應(yīng)再進(jìn)行硅烷化反應(yīng)。采用DB-5熔融石英毛細(xì)管柱，升溫程序?yàn)槌跏紲囟?0℃，保持4min，以8℃/min的速率升300℃，保持3min。在優(yōu)化測(cè)定條件下各對(duì)照品得到良好分離，且在測(cè)定范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系(r2>0.983)，平均加標(biāo)回收率為74.5％～104.2％，該方法簡(jiǎn)便、靈敏度高。孫多志等[17]在秸稈兩步稀酸水解工藝中，用氣相色譜／質(zhì)譜(GC/MS)法對(duì)其水解液中的單糖成分進(jìn)行測(cè)定，采用2％的氨溶液將稀酸水解液中的單糖還原成糖醇，然后在甲基咪唑催化劑的作用下和乙酸酐在水相中直接反應(yīng)生成乙?；奶谴?，用二氯甲烷萃取后進(jìn)行GC/MS測(cè)定。研究結(jié)果表明：秸稈稀酸水解液中有五種單糖，主要是木糖和葡萄糖，其次是阿拉伯糖、半乳糖和少量的甘露糖；利用此方法測(cè)定了一批秸稈稀酸水解液，得到了該秸稈稀酸水解過程的佳的反應(yīng)時(shí)間。該方法可快速、準(zhǔn)確測(cè)定秸稈稀酸水解液中單糖的濃度，為水解工藝的研究提供了一種有效的分析方法。

4多糖結(jié)構(gòu)分析

在生物質(zhì)精煉過程中伴隨著多聚糖的化學(xué)變化，研究多糖結(jié)構(gòu)變化對(duì)于糖平臺(tái)化合物的理論研究和產(chǎn)品開發(fā)具有重要意義。據(jù)文獻(xiàn)調(diào)研表明，目前該方法研究還處在起步階段，需要借鑒其他領(lǐng)域的現(xiàn)代分析方法，并且應(yīng)用到相關(guān)的基礎(chǔ)研究工作中去，從而積累更多分析經(jīng)驗(yàn)和方法創(chuàng)新。近年來多糖的結(jié)構(gòu)分析的儀器設(shè)備、分析方法都有了很大的提高。目前已有應(yīng)用的方法包括紫外光譜法、紅外光譜法和核磁共振分析法等。例如應(yīng)用1HNMR可以鑒別多糖中糖苷鍵位置，并進(jìn)一步確認(rèn)多糖結(jié)構(gòu)。AshutoshMittal等[18]通過核磁共振氫譜的測(cè)定方法分析在不同溫度和時(shí)間下闊葉木自催化水解半纖維素溶出物，從而評(píng)估該過程的反應(yīng)機(jī)理。對(duì)殘留的聚木糖、低聚木糖、木糖、葡萄糖及糖類次級(jí)衍生產(chǎn)品，例如糠醛、羧甲基糠醛，進(jìn)行了測(cè)定分析。單糖和低聚物則采用新的高分辨率核磁共振氫譜光譜分析法。該方法能定量分析水解抽提后的木料上殘余的聚木糖和纖維素殘留以及水解產(chǎn)物中的木糖和葡萄糖。研究表明，該方法具有良好的再現(xiàn)性并為分析碳水化合物的組成結(jié)構(gòu)提供了與以往報(bào)道方法結(jié)果可比擬的新方法。Xue-MingZhang等[19]采用傅里葉紅外變換、1H,13C以及2D-HSQCNMR核磁共振的分析方法，對(duì)有機(jī)溶劑提取的某白楊木品種半纖維素糖液進(jìn)行全面定性和定量分析，研究了木糖、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖及各種糖醛酸的組成，并通過核磁共振的方法研究了特定品種半纖維素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，包括乙?；肜w維素與葡萄糖醛酸、葡萄糖甘露聚糖的鍵合方式等，為進(jìn)一步發(fā)酵特定產(chǎn)品的機(jī)理研究提供了重要參考。

5技術(shù)對(duì)比與展望

與傳統(tǒng)糖類分析方法相比較，氣相色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)、毛細(xì)管電泳(CE)、高效陰離子交換-脈沖安培檢測(cè)法（HPAE-PAD）、離子色譜法(IC)、高效薄層色譜(HPTLC)等高效分離分析技術(shù)在很大程度上促進(jìn)了糖類平臺(tái)化合物的理論研究。各種方法在糖類物質(zhì)分析方面都有應(yīng)用，但也存在著各自的利弊特點(diǎn)。在未形成規(guī)范檢測(cè)體系前，復(fù)雜體系的糖類分離檢測(cè)要根據(jù)糖類物質(zhì)的具體性質(zhì)而定，并在實(shí)際檢測(cè)分析的工作中進(jìn)行篩選和總結(jié)。采用氣相色譜測(cè)定糖類，問題在于分析前預(yù)先轉(zhuǎn)化成易揮發(fā)、對(duì)熱較穩(wěn)定的衍生物。在某些衍生物的制備過程中，由于糖的異構(gòu)化會(huì)產(chǎn)生衍生物的異構(gòu)體，進(jìn)而影響組分的分離和定量。高效液相色譜分離速度快、分離效果好、分辨率高、重現(xiàn)性好且不破壞樣品，但糖類本身沒有紫外吸收，只能采用示差折光檢測(cè)器(RI)或蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè)。RI分辨率低而ELSD雖然效果好但價(jià)格昂貴，一般采用氨基柱但分離效果欠佳，而的糖柱又十分昂貴。薄層色譜法(TLC)是一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)室可快速分析單糖組成的微量而快速的分析方法，但對(duì)于復(fù)雜體系糖液分析的準(zhǔn)確度相對(duì)較低、適應(yīng)性不強(qiáng)。離子色譜法簡(jiǎn)單、快速、選擇性好、靈敏度高、可同時(shí)測(cè)定多組分，且不需要預(yù)先衍生化就能分析單糖、大部分的寡糖及低聚糖，正在為越來越多的研究者所采用?？傮w分析，高效液相色譜可以通過改變分離模式和色譜柱滿足不同性質(zhì)糖的分離，且有多種檢測(cè)方法能夠與其聯(lián)用以滿足定性和定量分析的要求。隨著新型、高選擇性的固定相，高靈敏度衍生化試劑以及質(zhì)譜等高效檢測(cè)技術(shù)的研究與發(fā)展，高效液相色譜及相關(guān)技術(shù)在生物質(zhì)精煉過程復(fù)雜體系的糖液分析中的地位必將愈加重要。離子色譜中陰離子交換色譜法-脈沖安培檢測(cè)技術(shù)對(duì)糖類化合物的分析檢測(cè)正逐步成熟完善。目前分析工作者正努力把陰離子交換色譜法-脈沖安培檢測(cè)的金電極的高靈敏性的檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)與帶有鋇離子的稀堿淋洗液的高效分離法的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，形成一種測(cè)定植物提取液中溶解糖類的理想方法